戰(zhàn)疫情||灰樹花抗病毒的科學(xué)和臨床研究

2020-02-03

世界上病毒種類多、變異快，人類與病毒的戰(zhàn)斗始終在進(jìn)行。正在中國(guó)爆發(fā)流行的新型冠狀病毒，目前沒有對(duì)癥治療藥物，增強(qiáng)自身免疫力、阻斷傳染源是戰(zhàn)勝該病毒的有效手段。針對(duì)當(dāng)前疫情，浙江百山祖生物科技有限公司根據(jù)多年來(lái)研究開發(fā)菌菇多糖產(chǎn)品的數(shù)據(jù)積累，將灰樹花抗病毒的科學(xué)和臨床研究進(jìn)行了整理，供參考。

灰樹花（Grifola frondosa，Maitake）又稱舞茸、栗蘑，是一種藥食兼用的珍稀食用菌?；覙浠ㄔ醋匀毡荆怨乓詠?lái)作為日本皇室的貢品備受推崇，在日本醫(yī)學(xué)界有“免疫之王”之稱，是日本人“原子彈時(shí)代的解藥”。熊谷達(dá)在《邂逅的森林》記載：1603年，統(tǒng)一日本的一代梟雄德川家康（とくがわぃえゃす）征戰(zhàn)中不幸患疾，眾御醫(yī)束手無(wú)策時(shí)，野生舞茸（灰樹花）卻讓他起死回生。德川家康當(dāng)時(shí)很可能就是病毒感染。

1834年，本坂浩然的《菌譜》記載舞蕈（灰樹花），能夠“潤(rùn)肺保肝，扶正固本”。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)其具有免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤作用，日本和美國(guó)有大量有關(guān)這方面的科學(xué)和臨床研究?；覙浠ㄒ脖憩F(xiàn)出良好的抗病毒作用。體外實(shí)驗(yàn)和臨床研究顯示灰樹花對(duì)流感病毒、艾滋病病毒、乙肝病毒、單純皰疹病毒和腸道病毒均表現(xiàn)出較好抑制作用，有望開發(fā)成為廣譜抗病毒藥物。

一、灰樹花抗流感病毒臨床研究

每年冬季各地都會(huì)發(fā)生流感，雖然有流感疫苗，但不是都有效，尤其對(duì)于老人、兒童、孕婦等特殊人群，流感疫苗作用非常有限。日本北海道大學(xué)的研究人員將100名健康的志愿者隨機(jī)分成2組，每組50人，實(shí)驗(yàn)組每日服用6.825克灰樹花粉片劑（20片），對(duì)照組服用同樣數(shù)量的麥芽糊精，連續(xù)服用12周，第四周時(shí)，所有人注射甲型和乙型流感疫苗。從試驗(yàn)開始，每四周采集血樣，檢測(cè)分析血凝抑制抗體、免疫指標(biāo)和生化指標(biāo)，同時(shí)調(diào)查發(fā)燒、咳嗽、咽喉痛、頭痛、肌肉酸疼等多種感冒癥狀情況。

針對(duì)(a)甲流H1N1 (b)甲流H3N 2 (c)乙流BX-51B ，60歲以上人群第8周和第12周血清轉(zhuǎn)換率，灰樹花組（黑色）顯著高于安慰劑組（灰色）。如下圖：

針對(duì)(a)甲流H1N1 (b)甲流H3N 2 (c)乙流BX-51B ，60歲以上人群第8周和第12周血清保護(hù)率，兩組甲流的作用相當(dāng)，但乙流的灰樹花組（黑色）顯著高于安慰劑組（灰色）。如下圖：

而對(duì)于經(jīng)過(guò)伴隨感冒發(fā)生的頭痛、肌肉痛、關(guān)節(jié)痛、不舒服、發(fā)燒、怕冷、咳嗽、痰多、喉嚨痛、流涕、鼻塞、沒有食欲和嘔吐等癥狀，服用灰樹花有非常顯著的改善。

灰樹花（Maitake）與安慰劑（Placebo）對(duì)頭痛(a)、肌肉痛和關(guān)節(jié)痛(b)、不舒服 (c)癥狀發(fā)生情況的比較：

灰樹花（Maitake）與安慰劑（Placebo）對(duì)發(fā)燒(d)、怕冷(e)、咳嗽 (f)發(fā)生情況的比較：

灰樹花（Maitake）與安慰劑（Placebo）對(duì)痰多(g)、喉嚨痛(h)、流涕 (i)發(fā)生情況的比較：

灰樹花（Maitake）與安慰劑（Placebo）對(duì)鼻塞(j)、無(wú)食欲(k)、嘔吐(l)發(fā)生情況的比較：

作者分析認(rèn)為，灰樹花抗流感病毒的作用主要在于通過(guò)誘導(dǎo)體內(nèi)抗病毒基因表達(dá)干擾素和激活體內(nèi)NK細(xì)胞，殺滅侵入體內(nèi)的流感病毒。灰樹花能夠有效提高流感疫苗的作用，激活體內(nèi)免疫系統(tǒng)。對(duì)于60歲以上的人群，服用灰樹花后，血清轉(zhuǎn)換率和血清保護(hù)率都得到提高，因此，用于老年人防治流感效果更加顯著。

二、灰樹花對(duì)艾滋病病毒感染患者的作用

日本神戶藥科大學(xué)與英國(guó)藥用植物臨床研究所合作開展了灰樹花治療艾滋病患者的臨床研究.研究者從英國(guó)和美國(guó)找到35名艾滋病患者，每位患者每天服用灰樹花6克灰樹花粉片劑或者20毫克灰樹花多糖提取物加4克灰樹花粉。連續(xù)服用服用360天。分析測(cè)定患者CD4，CD8細(xì)胞數(shù)量、病毒載量、白細(xì)胞介素2以及身體癥狀的變化情況。

CD4指標(biāo)可以反映HIV患者感染程度進(jìn)展情況。20位患者報(bào)告CD4增加，8位患者CD4減少；9位患者病毒載量增加，10位患者病毒載量減少。見下表：

有不少患者表現(xiàn)出的疲勞、體重減輕、視力下降、脫發(fā)、惡夢(mèng)、發(fā)燒怕冷、干咳、淋巴腫大、皮疹、黑指甲、腿痛和便秘等癥狀也有改善，結(jié)果如下：

另外，患者病的并發(fā)癥，如：弓形體病、隱球菌病、淋巴結(jié)病、帶狀皰疹、單純皰疹、卡波西肉瘤、肌肉病、陰道念珠菌、乳腺癌等疾病也進(jìn)行了觀察研究，都表現(xiàn)出效果：

從醫(yī)生對(duì)患者的癥狀的診斷和患者自我身體狀況的評(píng)價(jià)來(lái)看，效果是非常明顯的。其中醫(yī)生認(rèn)為90%患者癥狀有改善，85%患者認(rèn)為自己身體狀況有改善：

研究認(rèn)為灰樹花能夠增強(qiáng)體內(nèi)多種免疫細(xì)胞的能力，激活免疫系統(tǒng)，殺死HIV病毒和抑制病毒繁殖，改善患者的健康狀況，對(duì)于艾滋病患者是有效的。

三、灰樹花多糖抑制乙肝病毒活性的研究

本研究從灰樹花中提取獲得灰樹花多糖，純度90%。研究了不同濃度的灰樹花多糖對(duì)乙型肝炎細(xì)胞的作用，并與臨床上的抗病毒藥物拉米夫定(1amivudine，3TC，葛蘭素-史克制藥)進(jìn)行對(duì)照。研究發(fā)現(xiàn)，灰樹花多糖MP對(duì)乙肝表面抗原HBsAg分泌抑制作用不明顯，而MP對(duì)乙肝核心抗原HBeAg分泌抑制作用明顯，最大質(zhì)量濃度2 mg/ml作用6d后，HBeAg抑制率為70.31％，超過(guò)對(duì)照3TC的56.17％；9 d后MP對(duì)HBeAg抑制率高達(dá)91.29％，超過(guò)3TC的77.43％．且T檢驗(yàn)MP處理組和3TC處理組的抑制率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

給藥9 d后，0.1 mg／mL 3TC對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞HBV DNA的合成抑制率為92.13％。而MP對(duì)HBV DNA的合成抑制率呈劑量依賴性，見圖1。2、1、0.5、0.25、0.125 mg／mL MP對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞HBV DNA的合成抑制率分別為89.477％、81.930％、55.743％、36.610％和19.237％，與空白對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.5)， MP對(duì)HBV DNA的合成抑制作用有劑量依賴性，所用的最大質(zhì)量濃度2 mg／mL達(dá)到了與0．1mg／mL 3TC近似的抑制水平。

作者以HepG2.2.15細(xì)胞為模型，研究灰樹花多糖對(duì)HBV復(fù)制和表達(dá)的影響。結(jié)果顯示，體外實(shí)驗(yàn)中灰樹花多糖對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞增殖影響較小，而對(duì)HBeAg的分泌和HBV DNA的復(fù)制有較強(qiáng)的抑制作用，2 mg／mL處理細(xì)胞6 d后對(duì)HBeAg的分泌抑制率即超過(guò)陽(yáng)性對(duì)照藥物拉米夫定．而此質(zhì)量濃度作用細(xì)胞9 d后，對(duì)HBV DNA抑制效應(yīng)也與拉米夫定相近。MP對(duì)HBeAg分泌和HBV DNA合成的治療指數(shù)均大于2，但對(duì)HBsAg分泌的抑制作用不顯著，治療指數(shù)接近1。以上結(jié)果提示灰樹花多糖可作為一種有效低毒的抗HBV藥物，為其作為治療HBV感染輔助治療進(jìn)一步的動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用提供參考。

四、灰樹花抗單純皰疹病毒的研究

單純皰疹病毒(herpes simplex virus，HSV)是人類病毒感染性疾病中最常見的病毒。目前人群中HsV感染率在9O 以上，且近年來(lái)發(fā)病率持續(xù)上升，年發(fā)病率為2～3／10萬(wàn)。治療單純皰疹病毒化學(xué)藥品毒性大，副作用。本研究發(fā)現(xiàn)灰樹花提取物具有顯著的抗單純皰疹病毒效果，有望成為一種新型抗病毒產(chǎn)品。

研究人員從灰樹花子實(shí)體中分離提取得到分子量為29.5kDa灰樹花多糖，進(jìn)行了抑制單純皰疹病毒細(xì)胞的小鼠試驗(yàn)。作者分別比較研究了灰樹花多糖高濃度GFAHP（HD）、中濃度GFAHP（MD）、低濃度GFAHP（LD）、阿昔韋洛ACH和安慰劑Placebo對(duì)單純皰疹病毒引起的瞼炎、角膜血管炎、基質(zhì)角膜炎程度進(jìn)行了對(duì)比研究。

瞼炎在應(yīng)用灰樹花多糖高濃度GFAHP（HD）、中濃度GFAHP（MD）和阿昔韋洛ACH處理時(shí)，在第8天達(dá)到對(duì)嚴(yán)重，隨后快速減輕，如下圖：

角膜血管炎緩解情況除安慰劑Placebo組，其他各組都有較好改善，見下圖：

基質(zhì)角膜炎在灰樹花多糖高濃度GFAHP（HD）、中濃度GFAHP（MD）和阿昔韋洛ACH組中都，到18天時(shí)效果基本一致，但比安慰劑組好很多，如下圖：

作者比較研究了灰樹花多糖高濃度GFAHP（HD）、阿昔韋洛ACH和安慰劑Placebo對(duì)小鼠角膜病毒復(fù)制的影響，發(fā)現(xiàn)無(wú)論是在24小時(shí)還是48小時(shí)，灰樹花多糖高濃度GFAHP（HD）對(duì)小鼠角膜病毒的復(fù)制效果最好，阿昔韋洛ACH也有一定的效果。圖如下：

以上研究表明，從灰樹花中分離提取的灰樹花多糖對(duì)單純皰疹病毒具有較好的抑制作用，有望開發(fā)成為新型抗病毒藥物。

五、灰樹花抗腸道病毒EV71的研究

加州大學(xué)戴維斯分校、南京兒童醫(yī)院、福建農(nóng)林大學(xué)明尼蘇達(dá)大學(xué)合作開展了從灰樹花中分離得到新型多糖。該多糖的分子量為40.5 KD，主要由Beta-1,6-D-葡聚糖組成。研究從細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證明了該多糖能夠阻斷EV71腸道病毒的復(fù)制，抑制病毒的蛋白表達(dá)和和RNA合成。該多糖有助于預(yù)防兒童手足口病。

灰樹花多糖（GFP1）抑制EV71病毒復(fù)制。A GFP1對(duì)EV71病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞病變影響；B 感染EV71病毒的猴腎細(xì)胞在GFP1存在的生長(zhǎng)情況；C 猴腎細(xì)胞在GFP1存在時(shí)的細(xì)胞毒性變化情況；D GFP1存在時(shí)病毒復(fù)制和活性變化情況.見下圖：